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技術(shù)文章

液相色譜法測(cè)定食品中的激素含量

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食品中激素含量的測(cè)定——液相色譜法:樣品中的激素經(jīng)提取分離后,以液相色譜儀分離測(cè)定。利用保留時(shí)間定性,峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。

    測(cè)定方法步驟:

1 提取

    取可食用部分,搗成勻漿,稱取50g左右,置于250mL具塞錐形瓶中。加入內(nèi)標(biāo)物an眠酮20.00μg/mL貯備液1.0mL,再加甲醇-丙 酮(1:1)混合液150mL,在振蕩器上振蕩提取30min,過(guò)濾,殘?jiān)蒙倭考状?丙酮(1:1)混合液洗滌數(shù)次,洗滌并入濾液中,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或K-D濃縮器中將溶劑蒸除。殘?jiān)?0mL甲醇溶解,經(jīng)盛有無(wú)水硫酸鈉的漏斗濾入250mL分液漏斗中,再用10mL甲醇分?jǐn)?shù)次洗滌漏斗及內(nèi)容物,洗液并入濾液中。加pH=5.2的醋酸鈉緩沖溶液80mL左右,混勻后分三次用二氯甲烷(50mL、30mL、30mL)振搖提取,合并提取液,并用無(wú)水硫酸鈉脫水,在水浴上揮干溶劑。殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0.0mL,混勻后,以3000r/min速度離心5min,取上層清液供色譜分析用。

2 色譜條件:

    色譜柱4.6mm×200mm;流動(dòng)相:乙腈-甲醇-四氫呋喃-0.01mol/L醋酸鈉溶液(20:20:10:50);流速1.0ml/min;測(cè)定波長(zhǎng)270nm;進(jìn)樣體積10μL。

3 測(cè)定

    取供色譜用的樣品溶液10μL,注入液相色譜儀,以內(nèi)標(biāo)法定量。

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